1、常規(guī)方法收集對數(shù)期的貼壁細胞或者懸浮細胞于試管中。

 

　　2、根據(jù)培養(yǎng)細胞的密度和凍存管的大小確定所需凍存的細胞數(shù)。

 

　　3、將所需數(shù)目的細胞懸浮液置于離心管中，收集培養(yǎng)細胞沉淀，棄去離心管中的上清液。

 

　　4、加入適量的本凍存液于離心管中。輕柔地混勻細胞，制成細胞混合液。

 

　　5、將離心管中的細胞混合液分裝于已標(biāo)記的凍存管中。

 

　　6、直接將分裝好的細胞凍存管置于溫冰箱中，可長期保存。

 

　　7、若需液氮長期保存，需先置其中至少一天后方可轉(zhuǎn)至液氮罐中。

 

　　凍存液302-14681的凍存細胞復(fù)蘇步驟：

　　1、從冰箱中取出凍存的細胞，立即置于水浴槽中快速解凍。

 

　　2、待凍存管中的細胞混合液*融化后，立即加入細胞培養(yǎng)基于凍存管中與細胞混合，將其中的混合液移至含有該細胞培養(yǎng)基的離心管中，收集凍存細胞沉淀，移去上清液（注意勿將細胞沉淀倒掉）。

 

　　3、加入適量的新鮮培養(yǎng)基，使用移液管緩緩加入細胞沉淀中，輕柔混勻，將混勻好的細胞移至事先準(zhǔn)備好的培養(yǎng)容器中。

 

　　4、鏡檢觀察，待細胞狀態(tài)恢復(fù)后可進行其他研究或者培養(yǎng)處理。

 

　　凍存液302-14681的注意事項：

　　需在超凈臺內(nèi)使用，以避免雜菌污染。

 

　　需和細菌混勻，否則細菌凍存液無法起到在低溫冷凍條件下對細菌的保護作用。

 

　　對數(shù)期細菌凍存效果，但非對數(shù)期的或不是新鮮培養(yǎng)的細菌也可以用本細菌凍存液冷凍保存。